Hầu hết tác phẩm nổi tiếng nhất của Shakespeare được sáng tác trong giai đoạn 1589-1613. Ông sáng tác chủ yếu là bi kịch với các tác phẩm nổi tiếng như Hamlet, Vua Lear, Othello và Macbeth.
Hamlet là vở bi kịch được Shakespeare sáng tác năm 1601. Cốt truyện có nguồn gốc từ thể loại Saga (truyện dân gian) thời đại Trung cổ xoay quanh nhân vật trung tâm là Hamlet - hoàng tử nước Đan Mạch, sinh viên Đại học Wittenberg (Đức).
Khi vua cha chết được hai tháng thì mẹ chàng - hoàng hậu Gertrude tái giá lấy người chú ruột của chàng là Claudius. Hồn ma của vua cha hiện về báo cho chàng biết Claudius là kẻ đã giết cha mình để chiếm đoạt ngai vàng và hoàng hậu, yêu cầu Hamlet trả thù.
Hamlet từ đó lòng tràn đầy căm phẫn, ghê tởm và chán ghét cuộc đời. Chàng giả điên để che mắt kẻ thù, thực hiện nghĩa vụ.
Kết thúc vở kịch, Hamlet bị tử thương vì dính mũi kiếm tẩm độc nhưng cũng kịp dùng mũi kiếm này kết liễu tên vua Claudius. Hoàng hậu trong lúc xem đấu kiếm đã uống nhầm rượu độc mà vua định bẫy Hamlet, ngã ra chết.
Đánh giá về tác phẩm, nhiều nhà nghiên cứu nhận định Hamlet là một trong những bi kịch nổi tiếng nhất của lịch sử sân khấu thế giới. Trong một hình thức nghệ thuật kịch - thơ trữ tình, tác phẩm đã phản ánh được tinh thần của thời đại với sự khủng hoảng, bế tắc của lý tưởng nhân văn chủ nghĩa.